لینک پرداخت و دانلود "پایین مطلب:
فرمت فایل: word (قابل ویرایش)
تعداد صفحه: 34
فهرست مطالب:
بیماری های گیاهی ( ویروس های گیاهی )
مفهوم بیماری در گیاهان:
بیماریهای غیر واگیر:
بیماری های واگیر:
اختلاف ویروس های گیاهی با دیگر پاتوژن ها
آشکار سازی
مورفولوژی
اندازه و شکل
خواص شیمیایی ویروسها
عمل بیولوژیکی اجزای ویروس – کد کردن :
تولید بیماری و سنتز ویروسها :
انتقال ویروسهای گیاهی
خواص ویروس در عصاره خام:
دمای بی اثر شدن ویروس (TIP ) :
پایداری ویروس در محیط آزمایشگاه
حد نهایی رقت ویروس (DEP):
نگهداری ویروسهای گیاهی:
اثرات ویروسها روی گیاهان میزبان:
اثرات خارجی
اثرات ویروسها روی هیستولوژی و سیتولوژی گیاهان
هیستولوژیکی
سیتولوژیکی
آزمون نشت دو طرفه درآگار
روشهای شیمیایی برای تشخیص ویروسها
قسمتی از متن:
قابلیت انتقال یکی از صفات ویروسها است،که به چند روش انجام می شود:
1- انتقال ویروس از طریق مایع زنی مکانیکی : با استفاده از پودر کربراندوم (کربور سیلسیوم ) برای ایجاد خراش و زخم
علائم : ویروسهای منتقل شده به روش مکانیکی علائم موزاییکی و یا نکروتیک،وویروسهای منتقل شده توسط حشرات علائم زردی عمومی را نشان می دهد .
2- انتقال ویروسهای گیاهی توسط بذر حدود صد نوع ویروس شناخته شده که از طریق بذر منتقل می شوند .مثال:ویروس موزاییک هلو–موزاییک نواری–ویروس لکه حلقوی نکروتیک درختان میوه هسته دار–موزاییک یونجه . بیشتر ویروسها به نحوی قادر به حمله به جنین در حال رشد نیستند و علت این امر شاید این باشد که رابطه پلاسمودسمایی بین جنین و بافتهای مجاورش وجود ندارد یا ویروسها قادر به زندگی در سلولهای میکروسپور و میکروسکوپ و یا کیسه جنینی نیستند و یا اینکه به طور کلی درحین رسیدن، بلوغ و انبار کردن بذر اثر این ویروسها خنثی می شود . در حالتی که انتقال ویروس به بذر انجام می گیرد ویروس ممکن است در دانه گرده ، تخمدان و یا هر دو موجود می باشد .
3- انتقال ویروسهای گیاهی توسط دانه های گرده مثال ویروس حلقوی نکروتی درختان میوه هسته دار درآلبالو و کدو- ویروس زردی آلبالو
4- انتقال ویروسهای گیاهی توسط حشرات مهم ترین راه انتقال ویروسهای گیاهی در طبیعت می باشد . تاکنون 400 حشره شناخته شده اند که قادر به انتقال بیش از 200 نوع ویروس می باشد . از جمله شته ها و زنجره ها .شته ها 200 نوع ویروس را انتقال می دهند مانند شته سبز هلو که به تنهایی 60 ویروس را منتقل می کند . زنجره ها 50 درصد ویروسهای گیاهی را منتقل می کنند . حدود 90 درصد زنجره ها هر یک فقط یک مورد ویروس را انتقال می دهد .
1-4- ویروسهای نیش زاد:در شیارهای نیش حشره قرار گرفته به گیاه سالم انتقال می یابد .چند دقیقه تا 10 ساعت پایدارندNon persistant) (
2-4- ویروسهای گردش کننده:به کمک نیش شته از گیاه بیمار وارد دستگاه گوارش شته شده سپس از دیواره روده ها عبور کرده ، به خون و لنف و غده بزاقی منتقل شده و از طریق بزاق حشره به گیاه سالم منتقل می شود.10 تا 100 ساعت پایدارندSemipersistant))
3-4- ویروسهای تکثیر شونده :دربدن ناقل قادرند تکثیر شوند: پس از مدتی نهفتگی دربدن حشره در آنها قابلیت انتقال ایجاد می شود. تا 100 ساعت پایدارند persis tant) )
چند مثال از ویروس هایی که توسط حشرات انتقال می یابند :
شته ها : ویروس موزاییک خیار، یونجه و y سیب زمینی_ موزاییک کلم کوتولگی زرد جو
زنجره ها : ویروس پیچیدگی برگ چغندر ویروس کوتولگی زیر ذرت
سوسکها: ویروس موازییک کدو _ مگسهای سفید_ ویروس پیچیدگی برگ توتون
شپشکها: ویروس تورم شاخه های کاکائو
تریسیها: ویروس پژمردگی لکه ای گوجه فرنگی
5- انتقال به وسیله کنه ها :دو خانواده اریفیدا و تترانیچیدا چند ویروس را منتقل می کند مثل ویروس y سیب زمینی
6- انتقال به وسیله نماتدها مثال: نماتد ژانرها ی لانژیدورس (longidorus ) ناقل ویروسهای چند وجهی مثل حلقه سیاه گوجه فرنگی (black ring ) هستند
7- انتقال به وسیله قارچها مثال Pohymyxa xa graminis ویروس موزاییک گندم را منتقل می کند .
8- انتقال به وسیله سس (Dodder ): گیاه به گیاه توسط پلی که گیاه سس آن را ایجاد می کند .
انتشار ویروس ها : انتشار ویروس در داخل گیاه به نوع ویروس ، نوع گیاه و فعل و انفعالاتی که بین آن دو انجام می گیرد بستگی دارد .ویروسهایی که تولید بیماری از نوع موزاییک می کنند معمولا منحصر به بافت به خصوصی نیستند ولی ممکن است نحو های تمرکزمختلف داشته باشند .
خواص ویروس در عصاره خام:
1- دمای بی اثر شدن ویروس (TIP ) : دمایی که ویروس موجود در شیره خام در عرض 10 دقیقه کاملا غیر فعال می شود .
2- پایداری ویروس در محیط آزمایشگاه :عبارت است از مدت زمانی که ویروس می تواند آلودگی در عصاره خام گیاه در دمای متعارفی( 20 تا 22 درجه سانتیگراد ) حفظ کند . این غیر فعال شدن ویروس می تواند دراثرعمل آنزیمهای اکسید کننده و یا عوامل دیگر باشد.
3- حد نهایی رقت ویروس (DEP): عددی است بین دو نقطه ترقیق که در یکی ویروس هنوز قادر به ایجاد آلودگی است و در دیگری که رقت آن کمتر است اثری از آلودگی نمی باشد .
نگهداری ویروسهای گیاهی:
1- برگهای آلوده را خشک کرده در پاکت دربسته نگه می داریم.
2- برگ آلوده را درکیسه پلاستیکی در دمای زیر 20 درجه سانتیگراد نگه می داریم .
3- ویروسهای عصاره استخراج شده راپس ازسانتریفیوژ در 20 درجه سانتیگراد یا کمتر نگهداری می کنند . معمولا قابلیت نگهداری عصاره سانتریفیوژ شده از عصاره خام کمتر است .
4- قطعه برگ آلوده به ویروس را در آمپول قرار داده و پس از انجماد خشک درآن را می بندند .
خشک کردن سرد چگونه است ؟ با سرد کردن تنها یا با به کارگیری پنتوکسید فسفر به عنوان آبگیرنده (dissicant ) .
اثرات ویروسها روی گیاهان میزبان:
1- اثرات خارجی به صورت ظهور علائم زردی یا نکروز ( بافت مردگی ) یا تغییرات در رشد از واضح ترین اثرات خارجی اند . اغلب ویروسها به صورت سیستمیک گیاه راآلوده می کنند.اکثرویروسهای منتقل شده از طریق مایع زنی علائم موزاییک ونکروتیک را باعث می شوند . موزاییک از بارزترین علائم بیماریهای ویروسی است ، که عبارت است ازایجاد لکه های زرد در متن سبز پهنک برگ یا ایجاد لکه های سبزتیره وسبز کمرنگ که متناوبا پهلوی یکدیگر قرار می گیرند ، موزاییک می تواند با برآمدگیهای تاول مانند همراه باشد . دیگر علائم: تغییرات در رشد و نمو گیاهان – تغییرات در شکل اندامها – تغییرات در شکل میوه و بذر – تغییرات در ریشه – رشد غیر عادی - تغییر در عمر گیاه - پژمردگی – کم شدن قطر برگها – بد مزه شدن میوه ها – عقیم ماندن گیاه–کوتولگی–ایجاد نقش برگ بلوطی ونقش میخی در برگ – شکنندگی برگ و برگچه ها - چین خوردگی پهنگ برگ و قاشقی شدن آن - سفت شدن قسمتی از بافت و غیره
2- اثرات ویروسها روی هیستولوژی و سیتولوژی گیاهان
هیستولوژیکی : مانند اثرات هیپرپلازی به صورت ایجاد برآمدگی روی برگها (enation)و یا تغییرات ناشی از مرگ سلولها ( نکروتیک )
مثال : ایجاد رشته های چوبی به نام کمربند درون سلولی (Endo cellular cardon) در آوندهای آبکش مو آلوده به بیماری ویروسی برگ باد بزنی(fan leaf v. ).در کوتولگی زرد جودرآوندهای چوبی تیلوز تشکیل می شود. سیتولوژیکی : تغییراتی درساختمان ظریف سلولها.
مثلا: ایجاد تاول چه یا آبدانک در کلروپلاست بر اثر ویروس موزاییک زرد شلغم – ایجاد اجسام درون سلولی یا اینکلوژن بادی(Inclusion bodies )دراثرتجمع میتوکندریها حاصل از اثر توبراویروس ( tobraviruses )- یک تغییر قابل ذکر دیگر افزایش در تنفس گیاه است که ممکن است ساعتی بعد از تلقیح صورت گیرد .
3- ویروسهای گیاهی فاقد هر نوع ماده سمی ، آنزیمی ، و سایر مواد موثر در بیماری زایی بوده ولی با وجود این باعث ایجاد انواع اثرات مخرب در میزان خود می شود . در اثر تحریکات ویروس ، پروتئین هایی در سلول ساخته می شود که باعث اختلالاتی می گردند.مانند:
1- تغییر در نفوذپذیری غشای سلول
2- فعال سازی سیستمهای گیاه برای تولید مواد سمی
3- شکستن ویا تغییر مسیرسیکل های متابولیکی
4- اندوخته شدن مواد متابولیکی که معمولا ناپایدار است. ویروسها به طور کلی سبب تقلیل میزان کلروفیل ، تقلیل راندمان کلروفیل،تقلیل سطح کلی برگ ودرنتیجه کاهش فتوسنتز می شوند . ویروسهایی که باعث کوتولگی می گردند. روی هورمونهای رشد اثر می گذارند .
وجود 2 صفت بارز برای ایجاد فعل و انفعلات سرولوژیکی ضروری است:
برای ایجاد فعل و انفعالات سرولوژیکی باید دو صفات بارز وجود داشته باشد:
1- قابلیت تحریک سیستم دفاعی بدنی که به آن Immunogencity گفته می شود .
2- آنتی بادی تهیه شده بایستی بتواند با آنتی ژن مولد خود جفت شده و آن را رسوب دهد . به این خاصیت Antigencity گویند .
آزمون نشت دو طرفه درآگار: اولین بار توسط اخترلونی ( Ouchterlony)به کار برده شد ازاین روش برای تشخصیص ویروس موزاییک خیار استفاده می شود .
تست ELISA و DAS-ELISA:چاهک،آنتی بادی، نمونه ، مشکوک به آلودگی و آنزیم مورد نیاز اند .
روشهای شیمیایی برای تشخیص ویروسها :تعیین نسبت بازها دراسید نوکلئیک– تعیین نسبت اجزاء اسید آمینه در واحدهای پروتئین و تعداد آنها درهر پیکر ویروس – درصد RNA در هر ویروس . در صد RNA معمولا 5 تا 35 درصد است . در ویروسهای رشته ای 5 تا 6 درصد و در ویروسهای ایزومتریک بیشتر است. درصد RNA دریک ویروس و نژادهای آن عددی ثابت است .
خالص سازی ویروسها (Purification ): منظور خالص سازی ویروسهای گیاهی این است که تا حد امکان پیکر های ویروس را ازسایراجزاء سلول گیاهی جدا نماییم.در پاره ای از مطالعات مثل بررسی صفت شیمیایی ویروس یا ژنوم ویروس خالص سازی بسیار دقیق ویروس الزامی است .
جدا سازی ذرات ویروس :
1- رسوب دادن ذرات ویروس
2- استفاده از ژله های صافی (ژل آگار یا سفادکس (Gelfiltration )
3- استفاده از اولترا سانتریفیوژ (Ultracentrifuge)
سرعت رسوب به چند عامل بستگی دارد :
1- وزن مخصوص و شکل ذرات
2-سرعت دستگاه سانتریفیوژ
3- غلظت محیط یامایع(هرچه غلظت بیشترسرعت رسوب کمتر )
4- حرارت محیط ( هرچه حرارت بیشتر ، مایع رقیقتر، سرعت بیشتر)
تحقیق بیماری های گیاهی ( ویروس های گیاهی )
